山東省2015年春季高考畜牧養(yǎng)殖類專業(yè)技能考試試題

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    一、考試項目
    細菌革蘭氏染色及鏡檢
    二、儀器設備與材料
    1.操作臺、計時表、電光源顯微鏡、香柏油、二甲苯、擦鏡紙、酒精燈、火柴、細菌固體純培養(yǎng)物、接種環(huán)、載玻片、生理鹽水、草酸銨結(jié)晶紫染色液、革蘭氏碘液、95%酒精、稀釋的石炭酸復紅染色液、染色缸、染色架、洗瓶、鑷子、吸水紙、搪瓷托盤、試管架、污物桶等。
    2.工作服、一次性口罩、酒精消毒棉球、肥皂、毛巾等。
    三、操作規(guī)范與要求
    1.準備工作 穿著工作服,配戴口罩,清點物品。
    2.細菌涂片 接種環(huán)火焰滅菌,蘸取適量生理鹽水置于載玻片中央,再取少量細菌培養(yǎng)物與載玻片上的生理鹽水混勻,做成涂面。
    3.干燥 自然干燥或火焰加熱干燥。
    4.固定 火焰固定。
    5.革蘭氏染色
    (1)將涂片置于染色架上。
    (2)初染 滴加草酸銨結(jié)晶紫染色液,染色1~3min,水洗、甩干。
    (3)媒染 滴加革蘭氏碘液,染色1~2min,水洗、甩干。
    (4)脫色 滴加95%酒精,脫色30s,水洗、甩干。
    (5)復染 滴加稀釋的石炭酸復紅染色液,染色0.5~1min,水洗、甩干。
    (6)干燥 用吸水紙吸干或自然干燥。
    6.顯微鏡準備 取下防塵罩,接通電源,打開電源開關(guān)。
    7.調(diào)節(jié)視野亮度 選擇油鏡,調(diào)節(jié)光圈、聚光器和燈泡亮度,使視野均勻、明亮。
    8.油鏡鏡檢 在涂片待檢部位滴加一滴香柏油,將涂片固定于載物臺上,正確使用粗調(diào)節(jié)旋鈕和細調(diào)節(jié)旋鈕,直至出現(xiàn)清晰的細菌圖像。
    9.結(jié)果判定 判定并報告鏡檢結(jié)果:革蘭氏陽性菌或革蘭氏陰性菌。
    10.顯微鏡保養(yǎng)與維護 顯微鏡使用完畢,關(guān)閉開關(guān),切斷電源,下降載物臺和聚光器,取下涂片,將油鏡頭擦拭干凈。套上防塵罩。
    11.安全操作 遵循安全技術(shù)規(guī)范,注意操作安全,防止設備損壞,避免發(fā)生安全事故。
    12.考場紀律 遵守考場紀律,服從監(jiān)考人員安排??荚嚱Y(jié)束,整理所用物品。
    四、考試時間及考試組織
    1.考試時間:60分鐘。
    2.考試組織:采用現(xiàn)場實際操作形式,每位考生一個工位。
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