磺胺類藥物的分析
☆ ☆考點(diǎn)1：碘胺類藥物及其結(jié)構(gòu)
磺胺類藥物是一類用于治療細(xì)菌感染性疾病的合成藥物，均具有對(duì)氨基苯磺酰胺的基本結(jié)構(gòu)?！吨袊?guó)藥典》收載有磺胺甲 唑、磺胺嘧啶、磺胺異 唑等磺胺類藥物多種，其中磺胺甲 唑、磺胺嘧啶的結(jié)構(gòu)如下：
兩個(gè)藥物均有對(duì)氨基苯磺酰胺的基本結(jié)構(gòu)，其中磺胺甲 唑磺酰胺基N原子上為5-甲基異唑基取代，而磺胺嘧啶則為嘧啶基取代。兩個(gè)藥物均有芳伯氨基，因此可以發(fā)生重氮化反應(yīng)和重氮化-偶合反應(yīng)，可用于含量測(cè)定和鑒別?；酋０坊由系臍涫芑酋；娮有?yīng)的影響，比較活潑，可以與銀、銅、鈷等金屬離子成鹽，不同的磺胺藥物與硫酸銅反應(yīng)可生成不同顏色的銅鹽沉淀，常用于本類藥物的鑒別。
☆ ☆考點(diǎn)2：碘胺類藥物的鑒別試驗(yàn)
1．重氮化-偶合反應(yīng)
具有芳伯氨基的本類藥物，可用重氮化-偶合反應(yīng)鑒別。此反應(yīng)收載在《中國(guó)藥典》附錄“一般鑒別試驗(yàn)”項(xiàng)下，稱為“芳香第一胺類”鑒別反應(yīng)。鑒別方法為：取供試品約50mg，加稀鹽酸1ml，加0.1mol/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，生成橙黃色至猩紅色沉淀。反應(yīng)方程式為：
磺胺嘧啶和磺胺甲 唑均有芳伯氨基，所以均使用此反應(yīng)進(jìn)行鑒別。
2．與硫酸銅的成鹽反應(yīng)
本類藥物磺酰胺基上的氫原子比較活潑，具有酸性，可以和金屬離子（如Cu2+、Ag+、CO2+等）生成難溶性沉淀。其中與硫酸銅的反應(yīng)常用于本類藥物的鑒別，反應(yīng)如下：
如磺胺甲 唑的鑒別方法為：取本品約0.1g，加水與0.4%氫氧化鈉溶液各3ml，振搖使溶解，濾過，取濾液，加硫酸銅試液1滴，即生成草綠色沉淀。
磺胺嘧啶采用相同的方法試驗(yàn)，生成黃綠色沉淀，放置后變?yōu)樽仙?BR> 3．紅外光譜法
本類藥物數(shù)量較多，又都具有共同的母核，為區(qū)別不同的磺胺藥物，《中國(guó)藥典》收載有紅外分光光度法鑒別本類藥物。其中磺胺嘧啶的特征峰有：
磺胺甲 唑的特征峰有：
☆ ☆☆☆☆考點(diǎn)3：磺胺類藥物的含量測(cè)定
1．磺胺甲 唑和磺胺嘧啶的含量測(cè)定
磺胺嘧啶、磺胺甲 唑具有芳伯氨基，《中國(guó)藥典》使用亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量。如磺胺甲 唑的測(cè)定方法為：取本品約0.5g，精密稱定，加鹽酸溶液（1→2）25ml溶解后，再加水25ml，照永停滴定法，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，每1ml的亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于25.33mg的C10H11N3O3S。
本法在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，使用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。為加快滴定反應(yīng)的速度，滴定前要加入溴化鉀2g作為催化劑。為避免亞硝酸鈉在酸性條件下形成的亞硝酸揮發(fā)和分解，滴定時(shí)應(yīng)將滴定管尖端插入液面下2/3處，用亞硝酸鈉滴定液迅速滴定，隨滴隨攪拌，至近終點(diǎn)時(shí)，將滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，繼續(xù)緩緩滴定至終點(diǎn)?！吨袊?guó)藥典》用永停滴定法確定終點(diǎn)。終點(diǎn)前，電路上無電流通過，電流計(jì)指針指在零點(diǎn)。終點(diǎn)時(shí)，溶液中有了微量過量的亞硝酸，HNO2及其分解產(chǎn)物NO為可逆電對(duì)，在電極上可發(fā)生氧化還原反應(yīng)，電路中有電流通過，致使電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)，不再回復(fù)，而指示終點(diǎn)。
《中國(guó)藥典》收載的磺胺嘧啶、磺胺甲 唑以及大多數(shù)磺胺類藥物及其普通制劑，均采用本法測(cè)定含量。
2．復(fù)方磺胺制劑的含量測(cè)定
（1）復(fù)方磺胺甲 唑片的含量測(cè)定。磺胺甲 唑（SMZ）、甲氧芐啶（TMP）和制劑的紫外吸收光譜見下圖：
從上圖a可以看出，SMZ在257nm有吸收，若在257nm處測(cè)定含量，由于TMP在257nm也有吸收，可干擾測(cè)定。若以257nm作為測(cè)定波長(zhǎng)（λ2），根據(jù)TMP在304nm有等吸收，選擇304nm作為參比波長(zhǎng)（λ1），將供試品在此二波長(zhǎng)的吸收度之差（△A）作為定量的依據(jù)，可消除TMP的干擾?！鰽與C（SMZ）有線性關(guān)系，可以用對(duì)照品比較法測(cè)定其含量。
《中國(guó)藥典》復(fù)方磺胺甲 唑片中磺胺甲 唑的含量測(cè)定方法為：取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于磺胺甲 唑50mg），置100ml量瓶中，加乙醇適量，振搖15分鐘使磺胺甲 唑溶解，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；另精密稱取在105℃干燥至恒重的磺胺甲 唑?qū)φ掌?0mg與甲氧芐啶對(duì)照品10mg，分別置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀釋至刻度，作為對(duì)照品溶液（1）和對(duì)照品溶液（2）。精密量取供試品溶液及對(duì)照品溶液（1）、（2）各2ml，分置100ml量瓶中，各加0.4%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，照分光光度法，取對(duì)照品溶液（2）的稀釋液，以257nm為測(cè)定波長(zhǎng)（λ2），在304nm波長(zhǎng)附近（每間隔0.5nm）選擇等吸收點(diǎn)波長(zhǎng)作為參比波長(zhǎng)（λ1），要求△A= Aλ2- Aλ1=0，再在λ2與λ1處分別測(cè)定供試品溶液的稀釋液和對(duì)照品溶液（1）的稀釋液的吸收度，求出各自的△A，計(jì)算，即得。
含量測(cè)定結(jié)果的計(jì)算公式為：
式中，△AX和△AR--供試品溶液的稀釋液和對(duì)照品溶液（1）的稀釋液的吸收度差值；CR--SMZ對(duì)照品的稱樣量，g；W和 --片粉的稱樣量和平均片重，g。由于供試品溶液和對(duì)照品溶液是在完全平行的條件下測(cè)定的，所以稀釋的倍數(shù)可以不考慮。
TMP的測(cè)定是以鹽酸-氯化鉀溶液為溶劑，以239nm作為測(cè)定波長(zhǎng)（λ2），用SMZ對(duì)照液的稀釋液在295nm附近選擇等吸收波長(zhǎng)作為參比波長(zhǎng)（λ1），見上圖b，分別取供試品溶液和TMP對(duì)照品溶液，在測(cè)定波長(zhǎng)（λ2）和參比波長(zhǎng)（λ1）處測(cè)定吸收度，計(jì)算，即得。
（2）復(fù)方磺胺嘧啶片的含量測(cè)定?；前粪奏ぃ⊿D）的吸收波長(zhǎng)為308nm，此波長(zhǎng)處TMP無吸收，所以可直接測(cè)定SD的含量，見下圖中的1處。
方法為：取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于磺胺嘧啶0.2g）置100ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液適量，振搖使磺胺嘧啶溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液2ml，置另一100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，照分光光度法，在308nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度；另取105℃干燥至恒重的磺胺嘧啶對(duì)照品適量，精密稱定，加鹽酸溶液（9→1000）溶解并定量稀釋制成每1ml中約含40μg的溶液，同法測(cè)定，計(jì)算，即得。
本法為對(duì)照品比較法，含量測(cè)定結(jié)果的計(jì)算公式為：
式中，AX和AR--供試品溶液和對(duì)照品溶液的吸收度，CR--對(duì)照品溶液的濃度，μg/ml；W--稱樣量，g； --平均片重，g。
由于SD對(duì)TMP的測(cè)定有干擾，所以采用雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定TMP含量。先用醋酸提出TMP，SD僅部分被提出，用鹽酸溶液（9→1000）稀釋后，以308.0nm作為參比波長(zhǎng)（λ1），再在277.4nm附近，用SD對(duì)照品溶液的稀釋液選擇等吸收點(diǎn)，作為測(cè)定波長(zhǎng)（λ2），見上圖中的2處。分別取供試品溶液和TMP對(duì)照品溶液，在測(cè)定波長(zhǎng)（λ2）和參比波長(zhǎng)（λ1）處測(cè)定吸收度，計(jì)算，即得。