中藥鑒定學(xué):動(dòng)物藥類(lèi)——烏梢蛇的鑒別

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【性狀鑒別】
    呈圓盤(pán)狀,盤(pán)徑13~16cm.全體烏黑或黑褐色,被菱形細(xì)鱗,背鱗行數(shù)為偶數(shù),中央2~4行強(qiáng)烈起棱,形成兩條縱貫全體的黑線。頭盤(pán)在中央,扁圓形,口內(nèi)有多數(shù)刺狀牙齒。背部高聳成層脊?fàn)睿追Q(chēng)“劍脊”。腹部剖開(kāi)邊緣向內(nèi)卷曲。內(nèi)面黃白色或淡棕色,可見(jiàn)排列整齊的肋骨。尾部漸細(xì)而長(zhǎng)。質(zhì)堅(jiān)硬。氣腥,味淡。以頭尾齊全、皮黑肉黃、質(zhì)堅(jiān)實(shí)者為佳。
    去蛇皮藥材的骨骼鑒別法:
    ① 鼻骨背面觀:左右鼻骨背面整體觀成棱形,前端鈍圓,后端較尖銳。
    ② 軀椎側(cè)面觀:棘突高,前后緣較平直。前關(guān)節(jié)突上的關(guān)節(jié)面在基部上方,前后椎考試,大網(wǎng)站收集體下突形狀極不相同,即前部椎骨的椎體下突較長(zhǎng),豎刀狀,尖端略超過(guò)椎體的后隆面,以后逐漸變短,至中部椎骨的椎體下突成棱脊?fàn)?。脈突側(cè)面觀成馬蹄形,左右兩處向中線彎曲,彼此靠合。
    【顯微鑒別】
    取背鱗1片,用水裝置。觀察外表面:鱗片呈黃棕色,具縱直條紋,條紋間距13.7μm~27.4μm,沿鱗片基部至先端方向徑向排列,內(nèi)含色素斑。此特征為本品粉末鑒定的重要依據(jù)。
    背鱗橫切面觀:內(nèi)、外表皮均較平直,真皮不向外方突出,真皮中色素較多。
    粉末:黃色或淡棕色。
    ① 角質(zhì)鱗片表面隱約可見(jiàn)淡灰色細(xì)粒狀物,并具縱向條紋,平直或微彎曲,有的表面具極細(xì)密的平行紋理。
    ② 表皮淡黃色或黃色,表面觀可見(jiàn)密布棕色或棕黑色色素顆粒,常連成網(wǎng)狀、分枝狀。
    ③ 橫紋肌纖維多碎斷,呈條塊狀,邊緣平整,有細(xì)密橫紋,橫紋平直或微波狀,有的不清晰。
    ④ 骨碎片呈不規(guī)則碎塊,骨陷窩長(zhǎng)梭形,大多同方向排列,骨小管密而稍粗,于橫縱斷面均明顯可見(jiàn)。
    【成分】
    含蛋白質(zhì)22.1%、脂肪1.7%。含大量的鈣、磷、鎂常量元素和鐵、鋁、鋅、鍶等微量元素含量也較高;鋇的含量達(dá)109.168μg/g,是10種藥用蛇中含量的,應(yīng)引起注意。
    【理化鑒別】
    (1) 聚丙烯酰胺凝膠蛋白電泳鑒別:
    ① 試劑配制和凝膠制備:試劑和凝膠按文獻(xiàn)方法制備。分離膠濃度為7.5%,濃縮膠濃度為2.5%。
    ② 樣品液制備:取樣品1g,加入生理鹽水4ml,研磨成勻漿,以4000rpm離心15分鐘,取上清液,加入1倍量丙酮,4000rpm離心15分鐘,放置冰箱中備用。
    ③ 電泳分析:取樣上清液,加入1/2體積的40%蔗糖液,用微量注射器在凝膠樣品池中加樣,點(diǎn)樣量20μl.上電極液中加入數(shù)滴溴酚藍(lán)指示劑示蹤。電泳開(kāi)始時(shí),電流控制在10mA,樣品進(jìn)入分離膠后加大至15mA,待指示劑行至末端約1cm時(shí),即可停止電泳。取出膠板,放入7%乙酸溶液中固定10分鐘,然后放入0.2%考馬斯亮蘭考,試大網(wǎng)站收集R250染色液中染色半小時(shí)。用蒸餾水沖去凝膠表面附著的染料,再放入含20%甲醇和7%醋酸的脫色液中,脫色數(shù)小時(shí)至背景無(wú)色為止。
    電泳結(jié)果:烏梢蛇一級(jí)帶三條,二級(jí)帶和三級(jí)帶各二條,擴(kuò)散帶一條。
    (2) 紫外光譜鑒別:取粉末1g,分別用石油醚和無(wú)水乙醇各10ml浸泡36小時(shí),前6小時(shí)每隔1小時(shí)振搖1次,濾過(guò),濾液稀釋成一定濃度,置1cm比色池中,UV-265FW紫外分光光度計(jì)上測(cè)定吸收曲線,掃描范圍200~300nm,掃描速度60nm/分鐘。結(jié)果乙醇浸出液在210.0nm,石油醚浸出液在215.0、240.0、246.0處有吸收峰。此特征能與其他蛇類(lèi)區(qū)別。