多肽鏈中氨基酸序列分析
大綱已刪除該知識(shí)點(diǎn)。
多肽鏈中氨基酸序列分析包括下列步驟：
1．分析已純化蛋白質(zhì)的氨基酸殘基組成，計(jì)算肽鏈中氨基酸的個(gè)數(shù)或組成百分比。
2．測(cè)定多肽鏈的氨基末端和羧基末端為何種氨基酸殘基。最常用方法為丹酰氯法。多肽鏈的α－氨基可與丹酰氯反應(yīng)生成丹酰衍生物，該物質(zhì)具強(qiáng)烈熒光，可資鑒別。羧基側(cè)氨基酸殘基用羧肽酶水解下來(lái)后進(jìn)行鑒定。這樣鑒定出來(lái)的肽鏈頭、尾的氨基酸可作為整條肽鏈的標(biāo)志點(diǎn)。
3．將肽鏈水解成片段進(jìn)行分析。方法很多，胰蛋白酶可水解賴(lài)氨酸或精氨酸的羧基所形成的肽鍵；胰凝乳蛋白酶水解芳香族氨基酸羧基側(cè)的肽鏈；溴化氰水解蛋氨酸羧基側(cè)的肽鏈。
4．用肽段重疊法測(cè)定完整多肽鏈的序列。
現(xiàn)在由于分子生物學(xué)的迅猛發(fā)展，多采用蛋白質(zhì)編碼技術(shù)測(cè)定氨基酸序列。即先分離編碼蛋白質(zhì)的基因，測(cè)定DNA序列，排列出mRNA序列，按照三聯(lián)密碼的原則推演出氨基酸的序列。
【例31】2001N020A常用于測(cè)定多肽N末端氨基酸的試劑是
A．溴化氫
B．丹酰氯
C．β-巰基乙醇
D．羥胺
E．過(guò)甲酸
答案：B
常考點(diǎn)
幾種特殊的氨基酸；蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)；蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)及提純。
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多肽鏈中氨基酸序列分析包括下列步驟：
1．分析已純化蛋白質(zhì)的氨基酸殘基組成，計(jì)算肽鏈中氨基酸的個(gè)數(shù)或組成百分比。
2．測(cè)定多肽鏈的氨基末端和羧基末端為何種氨基酸殘基。最常用方法為丹酰氯法。多肽鏈的α－氨基可與丹酰氯反應(yīng)生成丹酰衍生物，該物質(zhì)具強(qiáng)烈熒光，可資鑒別。羧基側(cè)氨基酸殘基用羧肽酶水解下來(lái)后進(jìn)行鑒定。這樣鑒定出來(lái)的肽鏈頭、尾的氨基酸可作為整條肽鏈的標(biāo)志點(diǎn)。
3．將肽鏈水解成片段進(jìn)行分析。方法很多，胰蛋白酶可水解賴(lài)氨酸或精氨酸的羧基所形成的肽鍵；胰凝乳蛋白酶水解芳香族氨基酸羧基側(cè)的肽鏈；溴化氰水解蛋氨酸羧基側(cè)的肽鏈。
4．用肽段重疊法測(cè)定完整多肽鏈的序列。
現(xiàn)在由于分子生物學(xué)的迅猛發(fā)展，多采用蛋白質(zhì)編碼技術(shù)測(cè)定氨基酸序列。即先分離編碼蛋白質(zhì)的基因，測(cè)定DNA序列，排列出mRNA序列，按照三聯(lián)密碼的原則推演出氨基酸的序列。
【例31】2001N020A常用于測(cè)定多肽N末端氨基酸的試劑是
A．溴化氫
B．丹酰氯
C．β-巰基乙醇
D．羥胺
E．過(guò)甲酸
答案：B
常考點(diǎn)
幾種特殊的氨基酸；蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)；蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)及提純。