目的要求
1.了解實(shí)驗(yàn)原理。
2.學(xué)會(huì)DNA的粗提取和鑒定的方法,觀察提取出來的DNA物質(zhì)。
3.通過本實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作能力和觀察能力。
實(shí)驗(yàn)原理
1. DNA在NaCl溶液中的溶解度,是隨著NaCl的濃度的變化而改變的。 當(dāng)NaCl的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L時(shí),DNA的溶解度低。利用這一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2.DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA。
3.DNA遇二苯胺(沸水?。?huì)染成藍(lán)色,因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。
注意事項(xiàng)
1.步驟3析出含DNA的黏稠物中,蒸餾水要沿?zé)瓋?nèi)壁緩緩加入,不能快速倒入。
2.實(shí)驗(yàn)中有多個(gè)步驟都要用玻璃棒進(jìn)行攪拌,但是在不同的步驟中玻璃棒的用法不同。
實(shí)驗(yàn)用具
雞血細(xì)胞液(5~10 mL);體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精,蒸餾水,質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的檸檬酸鈉溶液,物質(zhì)的量濃度分別為2 mol/L和0.015 mol/L的NaCl溶液,二苯胺試劑;燒杯(100 mL,1個(gè), 50 mL, 500 mL,各2個(gè)),漏斗,試管(20 mL,2個(gè)),玻璃棒,滴管,量筒(100 mL,1個(gè)),紗布,鑷子,濾紙,鐵架臺,鐵環(huán),三角架,酒精燈,石棉網(wǎng),載玻片,試管夾。
課前準(zhǔn)備
制備雞血細(xì)胞液,方法是:將質(zhì)量濃度為0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液100mL,置于500 mL燒懷中,注入新鮮的雞血(約180 mL),用玻璃棒攪拌,使其充分混合,以免凝血。靜置于冰箱內(nèi)一天,使血細(xì)胞自行沉淀。(也可以用離心機(jī)離心2 min(轉(zhuǎn)速1000轉(zhuǎn)/分)。用吸管吸去上清液
1.了解實(shí)驗(yàn)原理。
2.學(xué)會(huì)DNA的粗提取和鑒定的方法,觀察提取出來的DNA物質(zhì)。
3.通過本實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作能力和觀察能力。
實(shí)驗(yàn)原理
1. DNA在NaCl溶液中的溶解度,是隨著NaCl的濃度的變化而改變的。 當(dāng)NaCl的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L時(shí),DNA的溶解度低。利用這一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2.DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA。
3.DNA遇二苯胺(沸水?。?huì)染成藍(lán)色,因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。
注意事項(xiàng)
1.步驟3析出含DNA的黏稠物中,蒸餾水要沿?zé)瓋?nèi)壁緩緩加入,不能快速倒入。
2.實(shí)驗(yàn)中有多個(gè)步驟都要用玻璃棒進(jìn)行攪拌,但是在不同的步驟中玻璃棒的用法不同。
實(shí)驗(yàn)用具
雞血細(xì)胞液(5~10 mL);體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精,蒸餾水,質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的檸檬酸鈉溶液,物質(zhì)的量濃度分別為2 mol/L和0.015 mol/L的NaCl溶液,二苯胺試劑;燒杯(100 mL,1個(gè), 50 mL, 500 mL,各2個(gè)),漏斗,試管(20 mL,2個(gè)),玻璃棒,滴管,量筒(100 mL,1個(gè)),紗布,鑷子,濾紙,鐵架臺,鐵環(huán),三角架,酒精燈,石棉網(wǎng),載玻片,試管夾。
課前準(zhǔn)備
制備雞血細(xì)胞液,方法是:將質(zhì)量濃度為0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液100mL,置于500 mL燒懷中,注入新鮮的雞血(約180 mL),用玻璃棒攪拌,使其充分混合,以免凝血。靜置于冰箱內(nèi)一天,使血細(xì)胞自行沉淀。(也可以用離心機(jī)離心2 min(轉(zhuǎn)速1000轉(zhuǎn)/分)。用吸管吸去上清液