(1)DNA變性和復(fù)性的概念
DNA變性(DNA denaturation):在極端的pH值(加酸或堿)和受熱條件下,DNA分子中雙鏈間的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi),這就是DNA的變性。依變性因素不同,有DNA的酸、堿變性,或DNA的熱變性之分。因?yàn)樽冃詴r(shí)堿基對(duì)之間的氫鍵斷開(kāi),相鄰堿基對(duì)之間的堆積力也受到破壞(但不伴有共價(jià)鍵斷裂),所以變性后的DNA在260nm的紫外光吸收增強(qiáng),稱為高色效應(yīng)(增色效應(yīng))。
在DNA變性中以DNA的熱變性意義。DNA的熱變性又稱DNA的解鏈或融解作用。在DNA熱變性過(guò)程中,使紫外吸收達(dá)到增值50%時(shí)的溫度稱為解鏈溫度,又稱融解溫度(Tm)。Tm與DNA分子G+C量有關(guān)。
變性后的DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)沒(méi)有改變。
退火:熱變性DNA溶液經(jīng)緩慢冷卻,兩條解鏈的互補(bǔ)單鏈重新締合,恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu)。
變性DNA的復(fù)性:變性DNA經(jīng)退火恢復(fù)原狀的過(guò)程。
低色效應(yīng)(減色效應(yīng)):伴隨復(fù)性,DNA溶液紫外吸收減弱。
DNA變性(DNA denaturation):在極端的pH值(加酸或堿)和受熱條件下,DNA分子中雙鏈間的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi),這就是DNA的變性。依變性因素不同,有DNA的酸、堿變性,或DNA的熱變性之分。因?yàn)樽冃詴r(shí)堿基對(duì)之間的氫鍵斷開(kāi),相鄰堿基對(duì)之間的堆積力也受到破壞(但不伴有共價(jià)鍵斷裂),所以變性后的DNA在260nm的紫外光吸收增強(qiáng),稱為高色效應(yīng)(增色效應(yīng))。
在DNA變性中以DNA的熱變性意義。DNA的熱變性又稱DNA的解鏈或融解作用。在DNA熱變性過(guò)程中,使紫外吸收達(dá)到增值50%時(shí)的溫度稱為解鏈溫度,又稱融解溫度(Tm)。Tm與DNA分子G+C量有關(guān)。
變性后的DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)沒(méi)有改變。
退火:熱變性DNA溶液經(jīng)緩慢冷卻,兩條解鏈的互補(bǔ)單鏈重新締合,恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu)。
變性DNA的復(fù)性:變性DNA經(jīng)退火恢復(fù)原狀的過(guò)程。
低色效應(yīng)(減色效應(yīng)):伴隨復(fù)性,DNA溶液紫外吸收減弱。