光度分析的方法
1．光度分析的幾種方法
（1）目視比色法
用眼睛比較溶液顏色的深淺以確定待測(cè)組分含量的方法，稱為目視比色法。最常用的是標(biāo)準(zhǔn)系列法。它是用一套質(zhì)料相同、大小形狀相同、帶有刻度、等體積的比色管組成。將一系列不同體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液依次加入比色管中，取一定量的待測(cè)溶液置于另一比色管中，然后分別加入等量的顯色劑及其它試劑，最后用水稀釋至刻度(比色管容量有10、25、50、100mL等幾種)。搖勻并放置一定時(shí)間待反應(yīng)達(dá)平衡后，從管口垂直向下觀察，比較待測(cè)液與標(biāo)準(zhǔn)溶液顏色的深淺。若待測(cè)液與某一標(biāo)準(zhǔn)液顏色深度一致，則說(shuō)明兩者濃度相等；如果待測(cè)液的顏色深度介于某相鄰兩標(biāo)準(zhǔn)之間，則取其平均值作為待測(cè)液的濃度。
目視比色法儀器簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、靈敏度也較高、顯色反應(yīng)如不遵從比耳定律也能進(jìn)行。因而它被廣泛應(yīng)用于準(zhǔn)確度要求不高的常規(guī)分析中。
目視比色法的主要缺點(diǎn)是準(zhǔn)確度不高，如果待測(cè)溶液中存在第二種有色物質(zhì)，甚至無(wú)法進(jìn)行測(cè)定。另外，由于許多有色溶液顏色不夠穩(wěn)定，標(biāo)準(zhǔn)系列不能久存，經(jīng)常在測(cè)定時(shí)需同時(shí)配制。
（2）光度分析法
通常，將使用光電比色計(jì)測(cè)定有色溶液的吸光度進(jìn)行定量分析的方法稱為光電比色法，將使用分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)定的方法稱為分光光度法。兩種方法的測(cè)定原理是相同的，所不同的僅在于獲得單色的方法不同，光電比色法是采用濾光片，而分光光度法是利用棱鏡或光柵單色器。由于兩者均基于吸光度的測(cè)定，所以可統(tǒng)稱為光度分析法。操作步驟都是測(cè)量一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，繪制工作曲線。并在相同條件下，測(cè)量待測(cè)試樣的吸光度，由工作曲線上查出試樣中待測(cè)物的含量。
光度法與目視比色法比較，具有下列優(yōu)點(diǎn)：
a. 使用儀器代替人眼進(jìn)行測(cè)量，消除了人工的主觀誤差，從而 提高了準(zhǔn)確度。
b. 測(cè)定溶液中有其它有色物質(zhì)共存時(shí)，可以選擇適當(dāng)?shù)膯紊夂蛥⒈热芤簛?lái)消除干擾，因而可提高選擇性。
c. 使用標(biāo)準(zhǔn)曲線法可簡(jiǎn)化手續(xù)，加快分析速度。
1．光度分析的幾種方法
（1）目視比色法
用眼睛比較溶液顏色的深淺以確定待測(cè)組分含量的方法，稱為目視比色法。最常用的是標(biāo)準(zhǔn)系列法。它是用一套質(zhì)料相同、大小形狀相同、帶有刻度、等體積的比色管組成。將一系列不同體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液依次加入比色管中，取一定量的待測(cè)溶液置于另一比色管中，然后分別加入等量的顯色劑及其它試劑，最后用水稀釋至刻度(比色管容量有10、25、50、100mL等幾種)。搖勻并放置一定時(shí)間待反應(yīng)達(dá)平衡后，從管口垂直向下觀察，比較待測(cè)液與標(biāo)準(zhǔn)溶液顏色的深淺。若待測(cè)液與某一標(biāo)準(zhǔn)液顏色深度一致，則說(shuō)明兩者濃度相等；如果待測(cè)液的顏色深度介于某相鄰兩標(biāo)準(zhǔn)之間，則取其平均值作為待測(cè)液的濃度。
目視比色法儀器簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、靈敏度也較高、顯色反應(yīng)如不遵從比耳定律也能進(jìn)行。因而它被廣泛應(yīng)用于準(zhǔn)確度要求不高的常規(guī)分析中。
目視比色法的主要缺點(diǎn)是準(zhǔn)確度不高，如果待測(cè)溶液中存在第二種有色物質(zhì)，甚至無(wú)法進(jìn)行測(cè)定。另外，由于許多有色溶液顏色不夠穩(wěn)定，標(biāo)準(zhǔn)系列不能久存，經(jīng)常在測(cè)定時(shí)需同時(shí)配制。
（2）光度分析法
通常，將使用光電比色計(jì)測(cè)定有色溶液的吸光度進(jìn)行定量分析的方法稱為光電比色法，將使用分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)定的方法稱為分光光度法。兩種方法的測(cè)定原理是相同的，所不同的僅在于獲得單色的方法不同，光電比色法是采用濾光片，而分光光度法是利用棱鏡或光柵單色器。由于兩者均基于吸光度的測(cè)定，所以可統(tǒng)稱為光度分析法。操作步驟都是測(cè)量一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，繪制工作曲線。并在相同條件下，測(cè)量待測(cè)試樣的吸光度，由工作曲線上查出試樣中待測(cè)物的含量。
光度法與目視比色法比較，具有下列優(yōu)點(diǎn)：
a. 使用儀器代替人眼進(jìn)行測(cè)量，消除了人工的主觀誤差，從而 提高了準(zhǔn)確度。
b. 測(cè)定溶液中有其它有色物質(zhì)共存時(shí)，可以選擇適當(dāng)?shù)膯紊夂蛥⒈热芤簛?lái)消除干擾，因而可提高選擇性。
c. 使用標(biāo)準(zhǔn)曲線法可簡(jiǎn)化手續(xù)，加快分析速度。