一、綜合安全等級(jí)評(píng)價(jià)方法概述
綜合安全等級(jí)評(píng)價(jià)方法是對(duì)水產(chǎn)苗種檢疫內(nèi)容中感官要求、寄生蟲(chóng)性疾病和細(xì)菌性疾病的檢疫結(jié)果進(jìn)行判定的方法。主要運(yùn)用模糊數(shù)學(xué)的基本理論，將各隸屬項(xiàng)進(jìn)行模糊量化，按三種檢測(cè)結(jié)果分別賦予1、2、4的分值，然后將各隸屬項(xiàng)的分值進(jìn)行相加，計(jì)算出系統(tǒng)綜合評(píng)分，根據(jù)系統(tǒng)綜合評(píng)分的分值來(lái)判斷系統(tǒng)的綜合安全等級(jí)。
二、水產(chǎn)苗種檢疫結(jié)果評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)
1、感官要求共包含五項(xiàng)指標(biāo)：
a、活力 b、感光能力 c、體表光潔度 d、傷殘、畸形率 e、死亡率
各項(xiàng)指標(biāo)的判定結(jié)果
感官要求 活力 感光能力 體表
光潔度 傷殘畸形率
（≤3%） 死亡率
（≤3%）
判定結(jié)果 強(qiáng)
不強(qiáng) 敏感
不敏感 干凈
不干凈 正常
不正常 正常
不正常
感官要求評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：
①五項(xiàng)指標(biāo)中全部指標(biāo)符合要求或僅有一項(xiàng)指標(biāo)未符合要求，則將其評(píng)分結(jié)果記為1；
②五項(xiàng)指標(biāo)中其中有兩項(xiàng)或三項(xiàng)指標(biāo)未符合要求，則將其評(píng)分結(jié)果記為2；
③五項(xiàng)指標(biāo)中其中有四項(xiàng)或全部指標(biāo)未符合要求，則將其評(píng)分結(jié)果記為4.
2、寄生蟲(chóng)檢測(cè)包括對(duì)寄生蟲(chóng)數(shù)量的判定及其優(yōu)勢(shì)種類別的鑒定，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為：
①組織內(nèi)（外）偶見(jiàn)寄生蟲(chóng)，則將其評(píng)分結(jié)果記為1；
②組織內(nèi)（外）容易發(fā)現(xiàn)寄生蟲(chóng)，但寄生蟲(chóng)數(shù)量較少，則將其評(píng)分結(jié)果記為2；
③組織內(nèi)（外）極易發(fā)現(xiàn)寄生蟲(chóng)，且寄生蟲(chóng)數(shù)量很多，則將其評(píng)分結(jié)果記為4；
3、細(xì)菌檢測(cè)包括對(duì)弧菌數(shù)量的測(cè)定及其優(yōu)勢(shì)菌種類的鑒定，以下為弧菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)程序及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：
（1）弧菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)程序
①樣本處理：
將初樣（混合樣）放入初樣管中，用無(wú)菌扦樣器搗碎樣本制成實(shí)驗(yàn)樣本。
②母液及稀釋液的制備：
用扦樣器扦取0.5g（0.5ml）實(shí)驗(yàn)樣本于母液管（內(nèi)含4.5ml Nacl溶液）中，制成母液，并振蕩混勻，此時(shí)母液管濃度級(jí)別為10-1.用微量移液器吸取母液管中的液體0.5ml，注入A管（內(nèi)含4.5ml Nacl溶液）配成濃度級(jí)別為10-2的稀釋液，并振蕩混勻。
以此類推，制成B管10-3稀釋液和C管10-4的稀釋液。
③細(xì)菌接種及培養(yǎng)：
用無(wú)菌微量移液器分別吸取ABC管中的稀釋液，向特定選擇性培養(yǎng)基TCBS上滴1滴溶液（0.05ml），并做平行對(duì)照組，微微搖晃使液體盡量散開(kāi)，待液體完全被培養(yǎng)及吸收后，放于25-28℃倒置培養(yǎng)36-48小時(shí)后取出計(jì)數(shù)。
④細(xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù)及計(jì)算均值無(wú)論細(xì)菌菌落大小均要求計(jì)數(shù)，經(jīng)計(jì)算得每個(gè)濃度的計(jì)數(shù)平均值分別用ABC來(lái)表示。
⑤結(jié)果判定原則：
a、首先選擇平均菌落在20~200之間的數(shù)值作為檢測(cè)結(jié)果，如果只有一項(xiàng)數(shù)值介于20~200之間，則選擇該數(shù)值為最終結(jié)果，即若A屬于[20，200]，BC不屬于[20，200]，則A為最終結(jié)果；
b、如果有兩項(xiàng)數(shù)值介于20~200之間，則按以下原則：
AB屬于[20~200]，C小于20，則選B為最終結(jié)果；
BC屬于[20，200]，A大于200，則選C為最終結(jié)果。
c、如果ABC均大于200，則選C為最終結(jié)果，如果ABC均小于20，則選A為最終結(jié)果。
d、可以接受的結(jié)果：
如果AB大于200，C小于20或A大于200，BC小于20，此兩種結(jié)果可由多種原因?qū)е拢璞容^實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照平行組來(lái)判定是否屬于上述幾種情況，如果認(rèn)為結(jié)果不能更改，則可選擇B為最終結(jié)果，B為可接受結(jié)果。
e、如果除了上述的這些情況外，還出現(xiàn)了其它的結(jié)果，則說(shuō)明實(shí)驗(yàn)過(guò)程中存在嚴(yán)重的錯(cuò)誤，應(yīng)當(dāng)重新實(shí)驗(yàn)。
（2）評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：
①弧菌總數(shù)計(jì)數(shù)的最終結(jié)果若選擇A為最終檢測(cè)結(jié)果的記為1；
②弧菌總數(shù)計(jì)數(shù)的最終結(jié)果若選擇B為最終檢測(cè)結(jié)果的記為2；
③弧菌總數(shù)計(jì)數(shù)的最終結(jié)果若選擇C為最終檢測(cè)結(jié)果的記為4；
三、安全等級(jí)的劃分
安全等級(jí)分成五個(gè)等級(jí)，具體如下：
綜合安全等級(jí)評(píng)分表
安全等級(jí) 安全 比較安全 一般安全 比較危險(xiǎn) 危險(xiǎn)
綜合評(píng)分 3、4 5、6 7、8 9、10 12
四、等級(jí)提升及等級(jí)提升原則
1、等級(jí)提升原理及概念：
由于不同致病性細(xì)菌或寄生蟲(chóng)對(duì)不同生物體造成的危害程度不同，所以每類生物體都有其專屬的致病性細(xì)菌或寄生蟲(chóng)病，為了更好地體現(xiàn)這種差異性，也為了更準(zhǔn)確地出具綜合安全等級(jí)評(píng)價(jià)結(jié)果，于是引入等級(jí)提升的概念：在細(xì)菌檢測(cè)或寄生蟲(chóng)檢測(cè)中，如果處于優(yōu)勢(shì)生長(zhǎng)的細(xì)菌或寄生蟲(chóng)，恰好為該品種主要細(xì)菌病或寄生蟲(chóng)病中的致病性細(xì)菌或寄生蟲(chóng)，則需進(jìn)行等級(jí)提升。
2、等級(jí)提升原則：
①范圍及條件：當(dāng)細(xì)菌檢測(cè)和寄生蟲(chóng)檢測(cè)中的最終判定結(jié)果級(jí)，即評(píng)分為4的時(shí)候，并且所鑒定的優(yōu)勢(shì)菌（種）種類為該樣本所列的致病性病源菌（種），則需進(jìn)行等級(jí)提升；
②系統(tǒng)等級(jí)提升：在系統(tǒng)綜合評(píng)分后，將系統(tǒng)的綜合安全等級(jí)向危險(xiǎn)等級(jí)方向提升一個(gè)等級(jí)，即如果系統(tǒng)綜合評(píng)分為7，系統(tǒng)綜合安全等級(jí)為一般安全等級(jí)，則經(jīng)過(guò)提升后，系統(tǒng)綜合安全等級(jí)為比較危險(xiǎn)等級(jí)。
綜合安全等級(jí)評(píng)價(jià)方法是對(duì)水產(chǎn)苗種檢疫內(nèi)容中感官要求、寄生蟲(chóng)性疾病和細(xì)菌性疾病的檢疫結(jié)果進(jìn)行判定的方法。主要運(yùn)用模糊數(shù)學(xué)的基本理論，將各隸屬項(xiàng)進(jìn)行模糊量化，按三種檢測(cè)結(jié)果分別賦予1、2、4的分值，然后將各隸屬項(xiàng)的分值進(jìn)行相加，計(jì)算出系統(tǒng)綜合評(píng)分，根據(jù)系統(tǒng)綜合評(píng)分的分值來(lái)判斷系統(tǒng)的綜合安全等級(jí)。
二、水產(chǎn)苗種檢疫結(jié)果評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)
1、感官要求共包含五項(xiàng)指標(biāo)：
a、活力 b、感光能力 c、體表光潔度 d、傷殘、畸形率 e、死亡率
各項(xiàng)指標(biāo)的判定結(jié)果
感官要求 活力 感光能力 體表
光潔度 傷殘畸形率
（≤3%） 死亡率
（≤3%）
判定結(jié)果 強(qiáng)
不強(qiáng) 敏感
不敏感 干凈
不干凈 正常
不正常 正常
不正常
感官要求評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：
①五項(xiàng)指標(biāo)中全部指標(biāo)符合要求或僅有一項(xiàng)指標(biāo)未符合要求，則將其評(píng)分結(jié)果記為1；
②五項(xiàng)指標(biāo)中其中有兩項(xiàng)或三項(xiàng)指標(biāo)未符合要求，則將其評(píng)分結(jié)果記為2；
③五項(xiàng)指標(biāo)中其中有四項(xiàng)或全部指標(biāo)未符合要求，則將其評(píng)分結(jié)果記為4.
2、寄生蟲(chóng)檢測(cè)包括對(duì)寄生蟲(chóng)數(shù)量的判定及其優(yōu)勢(shì)種類別的鑒定，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為：
①組織內(nèi)（外）偶見(jiàn)寄生蟲(chóng)，則將其評(píng)分結(jié)果記為1；
②組織內(nèi)（外）容易發(fā)現(xiàn)寄生蟲(chóng)，但寄生蟲(chóng)數(shù)量較少，則將其評(píng)分結(jié)果記為2；
③組織內(nèi)（外）極易發(fā)現(xiàn)寄生蟲(chóng)，且寄生蟲(chóng)數(shù)量很多，則將其評(píng)分結(jié)果記為4；
3、細(xì)菌檢測(cè)包括對(duì)弧菌數(shù)量的測(cè)定及其優(yōu)勢(shì)菌種類的鑒定，以下為弧菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)程序及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：
（1）弧菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)程序
①樣本處理：
將初樣（混合樣）放入初樣管中，用無(wú)菌扦樣器搗碎樣本制成實(shí)驗(yàn)樣本。
②母液及稀釋液的制備：
用扦樣器扦取0.5g（0.5ml）實(shí)驗(yàn)樣本于母液管（內(nèi)含4.5ml Nacl溶液）中，制成母液，并振蕩混勻，此時(shí)母液管濃度級(jí)別為10-1.用微量移液器吸取母液管中的液體0.5ml，注入A管（內(nèi)含4.5ml Nacl溶液）配成濃度級(jí)別為10-2的稀釋液，并振蕩混勻。
以此類推，制成B管10-3稀釋液和C管10-4的稀釋液。
③細(xì)菌接種及培養(yǎng)：
用無(wú)菌微量移液器分別吸取ABC管中的稀釋液，向特定選擇性培養(yǎng)基TCBS上滴1滴溶液（0.05ml），并做平行對(duì)照組，微微搖晃使液體盡量散開(kāi)，待液體完全被培養(yǎng)及吸收后，放于25-28℃倒置培養(yǎng)36-48小時(shí)后取出計(jì)數(shù)。
④細(xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù)及計(jì)算均值無(wú)論細(xì)菌菌落大小均要求計(jì)數(shù)，經(jīng)計(jì)算得每個(gè)濃度的計(jì)數(shù)平均值分別用ABC來(lái)表示。
⑤結(jié)果判定原則：
a、首先選擇平均菌落在20~200之間的數(shù)值作為檢測(cè)結(jié)果，如果只有一項(xiàng)數(shù)值介于20~200之間，則選擇該數(shù)值為最終結(jié)果，即若A屬于[20，200]，BC不屬于[20，200]，則A為最終結(jié)果；
b、如果有兩項(xiàng)數(shù)值介于20~200之間，則按以下原則：
AB屬于[20~200]，C小于20，則選B為最終結(jié)果；
BC屬于[20，200]，A大于200，則選C為最終結(jié)果。
c、如果ABC均大于200，則選C為最終結(jié)果，如果ABC均小于20，則選A為最終結(jié)果。
d、可以接受的結(jié)果：
如果AB大于200，C小于20或A大于200，BC小于20，此兩種結(jié)果可由多種原因?qū)е拢璞容^實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照平行組來(lái)判定是否屬于上述幾種情況，如果認(rèn)為結(jié)果不能更改，則可選擇B為最終結(jié)果，B為可接受結(jié)果。
e、如果除了上述的這些情況外，還出現(xiàn)了其它的結(jié)果，則說(shuō)明實(shí)驗(yàn)過(guò)程中存在嚴(yán)重的錯(cuò)誤，應(yīng)當(dāng)重新實(shí)驗(yàn)。
（2）評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：
①弧菌總數(shù)計(jì)數(shù)的最終結(jié)果若選擇A為最終檢測(cè)結(jié)果的記為1；
②弧菌總數(shù)計(jì)數(shù)的最終結(jié)果若選擇B為最終檢測(cè)結(jié)果的記為2；
③弧菌總數(shù)計(jì)數(shù)的最終結(jié)果若選擇C為最終檢測(cè)結(jié)果的記為4；
三、安全等級(jí)的劃分
安全等級(jí)分成五個(gè)等級(jí)，具體如下：
綜合安全等級(jí)評(píng)分表
安全等級(jí) 安全 比較安全 一般安全 比較危險(xiǎn) 危險(xiǎn)
綜合評(píng)分 3、4 5、6 7、8 9、10 12
四、等級(jí)提升及等級(jí)提升原則
1、等級(jí)提升原理及概念：
由于不同致病性細(xì)菌或寄生蟲(chóng)對(duì)不同生物體造成的危害程度不同，所以每類生物體都有其專屬的致病性細(xì)菌或寄生蟲(chóng)病，為了更好地體現(xiàn)這種差異性，也為了更準(zhǔn)確地出具綜合安全等級(jí)評(píng)價(jià)結(jié)果，于是引入等級(jí)提升的概念：在細(xì)菌檢測(cè)或寄生蟲(chóng)檢測(cè)中，如果處于優(yōu)勢(shì)生長(zhǎng)的細(xì)菌或寄生蟲(chóng)，恰好為該品種主要細(xì)菌病或寄生蟲(chóng)病中的致病性細(xì)菌或寄生蟲(chóng)，則需進(jìn)行等級(jí)提升。
2、等級(jí)提升原則：
①范圍及條件：當(dāng)細(xì)菌檢測(cè)和寄生蟲(chóng)檢測(cè)中的最終判定結(jié)果級(jí)，即評(píng)分為4的時(shí)候，并且所鑒定的優(yōu)勢(shì)菌（種）種類為該樣本所列的致病性病源菌（種），則需進(jìn)行等級(jí)提升；
②系統(tǒng)等級(jí)提升：在系統(tǒng)綜合評(píng)分后，將系統(tǒng)的綜合安全等級(jí)向危險(xiǎn)等級(jí)方向提升一個(gè)等級(jí)，即如果系統(tǒng)綜合評(píng)分為7，系統(tǒng)綜合安全等級(jí)為一般安全等級(jí)，則經(jīng)過(guò)提升后，系統(tǒng)綜合安全等級(jí)為比較危險(xiǎn)等級(jí)。