實驗室預(yù)測 以致齲菌及酸性產(chǎn)物為指標(biāo),檢測齲發(fā)生危險因素的試驗稱齲活性試驗。目前較成熟的方法如下:
(1) Dentocult SM試驗
目的:以觀察唾液中每毫升菌落形成單位(CFU/ml)的變形鏈球菌數(shù)量來判斷齲的活性。
試劑盒:含有輕唾選擇培養(yǎng)液的5ml帶螺帽的培養(yǎng)試管、標(biāo)準(zhǔn)的塑膠附著板、桿菌肽紙片及石蠟。
檢測方法:先令受試者咀嚼一粒石蠟丸1分鐘后,持附著板在舌背部翻轉(zhuǎn)涂抹10次,立即將板放置培養(yǎng)試管內(nèi),旋上螺帽,37℃,48小時培養(yǎng)后,計數(shù)在附著板上的變形鏈球菌落(藍色)密度情況。
結(jié)果判斷:分四級:“0和1”<105;“2”< 105~106;“3”>106?!?”為高齲的活性。
(2) Dentocule LB試驗
目的:主要觀察乳桿菌在唾液的數(shù)量。
試劑盒:含乳桿菌固體培養(yǎng)基試板,帶螺帽培養(yǎng)管。
檢測方法:受試者先咀嚼石蠟丸1分鐘后,收集唾液于容器內(nèi),再將唾液均勻澆在培養(yǎng)板上的培養(yǎng)基表面,懸去多余唾液,放置培養(yǎng)管內(nèi),35℃4天培養(yǎng),計數(shù)培養(yǎng)板上附著乳桿菌菌落密度。
結(jié)果判斷:1 000/ml( 103 CFU/ml)、10 000/ml( 104 CFU/ml)、100 000/ml (105CFU/ml)、
1000000/m1(106 CFU/ml)。>10 000/ml(104 CFU/ml)為高齲的活性
(3) Cariostat試驗
目的:檢測牙表面菌斑內(nèi)產(chǎn)酸菌的產(chǎn)酸能力。
試劑盒:含溴甲酚紫及溴甲酚綠的液體培養(yǎng)管、標(biāo)準(zhǔn)棉簽。
檢測方法:用標(biāo)準(zhǔn)棉簽涂擦一側(cè)牙頰面菌斑4~5次,將棉簽放置培養(yǎng)管內(nèi),37℃48小時培養(yǎng),觀察培養(yǎng)液顏色變化。
結(jié)果判斷:藍紫色(-);綠色(+);黃綠色(++);黃色(+++)。(++)培養(yǎng)管內(nèi)pH 5.0~5.5為危險齲活性,(+++)為明顯齲活性。
(4) Dentobuff Strip試驗
目的:了解唾液的緩沖能力。
產(chǎn)品:黃色試條。
方法與原理,。將含指示劑的黃色酸性試條浸受試者唾液后,可使酸性試條pH提高,則試條變?yōu)樗{色,說明唾液一定緩沖能力。
結(jié)果判斷;用試條浸受試者唾液(操作似pH試紙的使用)。試條從黃色變?yōu)樗{色,表示pH >6.0說明唾液有緩沖能力,顏色不變則緩沖能力差。
(5)刃天青紙片法
目的:用顏色顯色法觀察唾液內(nèi)變形鏈球菌的數(shù)量。
試劑盒:直徑8mm,含刃天晴、蔗糖及聚乙醇酯圓紙片,2個聚乙烯薄膜。
方法及原理:刃天青是氧化還原指示劑,變形鏈球菌與紙片上的蔗糖發(fā)生氧化還原反應(yīng)強弱,顯示不同的顏色反應(yīng)。方法是用紙片浸受試者唾液,除去多余唾液,將紙片放在2個聚乙烯薄膜間壓緊,放在受試者腋下夾緊(約32℃)15分鐘,觀察結(jié)果。
結(jié)果判斷:紙片藍色(-);紫藍色(+);紅紫色(++);粉色(+++);白色(++++)。
粉色(+++)以上為齲活性。
(6)定量PCR方法:
以變形鏈球菌特異性引物,用定量PCR方法檢測受試者唾液內(nèi)變形鏈球菌數(shù)量判斷齲活性。
(1) Dentocult SM試驗
目的:以觀察唾液中每毫升菌落形成單位(CFU/ml)的變形鏈球菌數(shù)量來判斷齲的活性。
試劑盒:含有輕唾選擇培養(yǎng)液的5ml帶螺帽的培養(yǎng)試管、標(biāo)準(zhǔn)的塑膠附著板、桿菌肽紙片及石蠟。
檢測方法:先令受試者咀嚼一粒石蠟丸1分鐘后,持附著板在舌背部翻轉(zhuǎn)涂抹10次,立即將板放置培養(yǎng)試管內(nèi),旋上螺帽,37℃,48小時培養(yǎng)后,計數(shù)在附著板上的變形鏈球菌落(藍色)密度情況。
結(jié)果判斷:分四級:“0和1”<105;“2”< 105~106;“3”>106?!?”為高齲的活性。
(2) Dentocule LB試驗
目的:主要觀察乳桿菌在唾液的數(shù)量。
試劑盒:含乳桿菌固體培養(yǎng)基試板,帶螺帽培養(yǎng)管。
檢測方法:受試者先咀嚼石蠟丸1分鐘后,收集唾液于容器內(nèi),再將唾液均勻澆在培養(yǎng)板上的培養(yǎng)基表面,懸去多余唾液,放置培養(yǎng)管內(nèi),35℃4天培養(yǎng),計數(shù)培養(yǎng)板上附著乳桿菌菌落密度。
結(jié)果判斷:1 000/ml( 103 CFU/ml)、10 000/ml( 104 CFU/ml)、100 000/ml (105CFU/ml)、
1000000/m1(106 CFU/ml)。>10 000/ml(104 CFU/ml)為高齲的活性
(3) Cariostat試驗
目的:檢測牙表面菌斑內(nèi)產(chǎn)酸菌的產(chǎn)酸能力。
試劑盒:含溴甲酚紫及溴甲酚綠的液體培養(yǎng)管、標(biāo)準(zhǔn)棉簽。
檢測方法:用標(biāo)準(zhǔn)棉簽涂擦一側(cè)牙頰面菌斑4~5次,將棉簽放置培養(yǎng)管內(nèi),37℃48小時培養(yǎng),觀察培養(yǎng)液顏色變化。
結(jié)果判斷:藍紫色(-);綠色(+);黃綠色(++);黃色(+++)。(++)培養(yǎng)管內(nèi)pH 5.0~5.5為危險齲活性,(+++)為明顯齲活性。
(4) Dentobuff Strip試驗
目的:了解唾液的緩沖能力。
產(chǎn)品:黃色試條。
方法與原理,。將含指示劑的黃色酸性試條浸受試者唾液后,可使酸性試條pH提高,則試條變?yōu)樗{色,說明唾液一定緩沖能力。
結(jié)果判斷;用試條浸受試者唾液(操作似pH試紙的使用)。試條從黃色變?yōu)樗{色,表示pH >6.0說明唾液有緩沖能力,顏色不變則緩沖能力差。
(5)刃天青紙片法
目的:用顏色顯色法觀察唾液內(nèi)變形鏈球菌的數(shù)量。
試劑盒:直徑8mm,含刃天晴、蔗糖及聚乙醇酯圓紙片,2個聚乙烯薄膜。
方法及原理:刃天青是氧化還原指示劑,變形鏈球菌與紙片上的蔗糖發(fā)生氧化還原反應(yīng)強弱,顯示不同的顏色反應(yīng)。方法是用紙片浸受試者唾液,除去多余唾液,將紙片放在2個聚乙烯薄膜間壓緊,放在受試者腋下夾緊(約32℃)15分鐘,觀察結(jié)果。
結(jié)果判斷:紙片藍色(-);紫藍色(+);紅紫色(++);粉色(+++);白色(++++)。
粉色(+++)以上為齲活性。
(6)定量PCR方法:
以變形鏈球菌特異性引物,用定量PCR方法檢測受試者唾液內(nèi)變形鏈球菌數(shù)量判斷齲活性。