2012衛(wèi)生資格考試復(fù)習(xí)指導(dǎo)抗凝物質(zhì)測(cè)定
1.抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ：A）測(cè)定
（1）血漿抗凝血酶Ⅲ活性測(cè)定
1）原理：發(fā)色底物法：受檢血漿中加入過(guò)量凝血酶，使AT-Ⅲ與凝血酶形成1：1復(fù)合物，剩余的凝血酶作用于發(fā)色底物S-2238，釋出顯色基因?qū)ο趸桨罚≒NA），顯色的深淺與剩余凝血酶呈正相關(guān)，而與AT-Ⅲ呈負(fù)相關(guān)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出AT：A的含量。
2）參考范圍：108.5%士5.3%。
（2）血漿抗凝血酶Ⅲ抗原（AT：Ag）檢測(cè)
1）原理：免疫學(xué)方法如火箭電泳法、免疫酶標(biāo)及免疫比濁法。
2）參考范圍：0.29±0.06g／L。
3）臨床意義：①增高見(jiàn)于血友病、白血病和再生障礙性貧血等的急性出血期以及口服抗凝藥物治療過(guò)程中。②減低見(jiàn)于先天性和獲得性AT-Ⅲ缺乏癥，后者見(jiàn)于血栓前狀態(tài)、血栓性疾病和肝臟疾病、腎病綜合征等。中西醫(yī)執(zhí)業(yè)
4）評(píng)價(jià)：①標(biāo)本不能用肝素抗凝。②AT-Ⅲ抗原和活性測(cè)定同時(shí)檢測(cè)，以利于進(jìn)行先天性AT-Ⅲ缺乏的分型。③在疑難DIC診斷時(shí)，AT- Ⅲ水平下降具有診斷價(jià)值；急性白血病時(shí)AT-Ⅲ水平降低更可看作是DIC發(fā)生的信號(hào)；抗凝治療中，如懷疑肝素抵抗，可測(cè)定AT-Ⅲ來(lái)確定；抗凝血酶代替治療時(shí)，也應(yīng)首選AT-Ⅲ檢測(cè)來(lái)監(jiān)測(cè)。
2.血漿蛋白C（PC）測(cè)定
（1）血漿蛋白C活性測(cè)定
1）原理：血漿蛋白C活性（PC：A）測(cè)定，發(fā)色底物法：受檢血漿中加入蛋白C激活劑（從蛇毒中提?。C被激活為活化蛋白 C（APC），APC作用于發(fā)色底物Chromozym PCA，釋出顯色基團(tuán)對(duì)硝基苯胺（PNA），顯色的深淺與受檢血漿中PC的含量成平行關(guān)系。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出AT：A的含量。
2）參考值：100.24%±l3.18%。
（2）血漿蛋白C抗原測(cè)定
1）原理：血漿蛋白C抗原（PC：Ag）檢測(cè)，免疫火箭電泳法。
2）參考值：102.5%±20.1%。
3）臨床意義：減低：①見(jiàn)于先天性PC缺陷：根據(jù)PC：A和PC：Ag可分為Ⅰ型（PC：Ag與PC：A均減低）和Ⅱ型（PC：Ag正常而PC：A減低）；②獲得性PC缺陷：DIC、肝功能不全、手術(shù)后、口服雙香豆素抗凝劑、呼吸窘迫綜合征等。
3.血漿蛋白S測(cè)定
（1）血漿總蛋白S測(cè)定
1）原理：血漿總蛋白S（TPS）包括游離PS（FPS）和與補(bǔ)體C4結(jié)合的PS（C4bp-PS）。由于二者對(duì)于抗人蛋白S抗體有相似反應(yīng)，因此用免疫學(xué)方法（如火箭電泳、酶聯(lián)免疫法）檢測(cè)的是TPS。
2）參考值：97.56%±9.76% 。
3）臨床意義：減低：見(jiàn)于先天性和獲得性PS缺陷癥，后者見(jiàn)于肝臟疾病、口服抗凝藥物等。
（2）血漿游離蛋白S（FPS）測(cè)定：
1）原理：凝固法。受檢血漿中加入乏PS基質(zhì)血漿（提供除PS外的其他凝血因子），PS可促進(jìn)APC對(duì)因子V a的抑制作用，纖維蛋白形成所需的時(shí)間與受檢血漿中FPS的量成正相關(guān)。受檢者凝固時(shí)間可從標(biāo)準(zhǔn)曲線中計(jì)算出FPS的含量。
2）參考值：100.9%士29.1%。公共衛(wèi)生執(zhí)業(yè)
3）臨床意義：參見(jiàn)血漿總蛋白S測(cè)定。
4.血漿活化蛋白C抵抗（APCR）試驗(yàn)
（1）原理：在受檢血漿中加入FⅫ激活劑和部分凝血活酶，啟動(dòng)內(nèi)源性凝血途徑，再加入活化的蛋白C（APC），由于APC可裂解FⅧa、FⅤ a，使其滅活，導(dǎo)致APTT延長(zhǎng)。如果受檢血漿APTT延長(zhǎng)不明顯，提示患者存在活化蛋白C抵抗現(xiàn)象。通過(guò)比較加和未加APC的APTT比值的高低判斷 APCR存在與否。
（2）參考范圍：APCR比值=APC-APTT（S）／APTT（S），》2.0。
（3）臨床意義：FⅤ Leiden突變時(shí)，APCR陽(yáng)性。
1.抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ：A）測(cè)定
（1）血漿抗凝血酶Ⅲ活性測(cè)定
1）原理：發(fā)色底物法：受檢血漿中加入過(guò)量凝血酶，使AT-Ⅲ與凝血酶形成1：1復(fù)合物，剩余的凝血酶作用于發(fā)色底物S-2238，釋出顯色基因?qū)ο趸桨罚≒NA），顯色的深淺與剩余凝血酶呈正相關(guān)，而與AT-Ⅲ呈負(fù)相關(guān)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出AT：A的含量。
2）參考范圍：108.5%士5.3%。
（2）血漿抗凝血酶Ⅲ抗原（AT：Ag）檢測(cè)
1）原理：免疫學(xué)方法如火箭電泳法、免疫酶標(biāo)及免疫比濁法。
2）參考范圍：0.29±0.06g／L。
3）臨床意義：①增高見(jiàn)于血友病、白血病和再生障礙性貧血等的急性出血期以及口服抗凝藥物治療過(guò)程中。②減低見(jiàn)于先天性和獲得性AT-Ⅲ缺乏癥，后者見(jiàn)于血栓前狀態(tài)、血栓性疾病和肝臟疾病、腎病綜合征等。中西醫(yī)執(zhí)業(yè)
4）評(píng)價(jià)：①標(biāo)本不能用肝素抗凝。②AT-Ⅲ抗原和活性測(cè)定同時(shí)檢測(cè)，以利于進(jìn)行先天性AT-Ⅲ缺乏的分型。③在疑難DIC診斷時(shí)，AT- Ⅲ水平下降具有診斷價(jià)值；急性白血病時(shí)AT-Ⅲ水平降低更可看作是DIC發(fā)生的信號(hào)；抗凝治療中，如懷疑肝素抵抗，可測(cè)定AT-Ⅲ來(lái)確定；抗凝血酶代替治療時(shí)，也應(yīng)首選AT-Ⅲ檢測(cè)來(lái)監(jiān)測(cè)。
2.血漿蛋白C（PC）測(cè)定
（1）血漿蛋白C活性測(cè)定
1）原理：血漿蛋白C活性（PC：A）測(cè)定，發(fā)色底物法：受檢血漿中加入蛋白C激活劑（從蛇毒中提?。C被激活為活化蛋白 C（APC），APC作用于發(fā)色底物Chromozym PCA，釋出顯色基團(tuán)對(duì)硝基苯胺（PNA），顯色的深淺與受檢血漿中PC的含量成平行關(guān)系。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出AT：A的含量。
2）參考值：100.24%±l3.18%。
（2）血漿蛋白C抗原測(cè)定
1）原理：血漿蛋白C抗原（PC：Ag）檢測(cè)，免疫火箭電泳法。
2）參考值：102.5%±20.1%。
3）臨床意義：減低：①見(jiàn)于先天性PC缺陷：根據(jù)PC：A和PC：Ag可分為Ⅰ型（PC：Ag與PC：A均減低）和Ⅱ型（PC：Ag正常而PC：A減低）；②獲得性PC缺陷：DIC、肝功能不全、手術(shù)后、口服雙香豆素抗凝劑、呼吸窘迫綜合征等。
3.血漿蛋白S測(cè)定
（1）血漿總蛋白S測(cè)定
1）原理：血漿總蛋白S（TPS）包括游離PS（FPS）和與補(bǔ)體C4結(jié)合的PS（C4bp-PS）。由于二者對(duì)于抗人蛋白S抗體有相似反應(yīng)，因此用免疫學(xué)方法（如火箭電泳、酶聯(lián)免疫法）檢測(cè)的是TPS。
2）參考值：97.56%±9.76% 。
3）臨床意義：減低：見(jiàn)于先天性和獲得性PS缺陷癥，后者見(jiàn)于肝臟疾病、口服抗凝藥物等。
（2）血漿游離蛋白S（FPS）測(cè)定：
1）原理：凝固法。受檢血漿中加入乏PS基質(zhì)血漿（提供除PS外的其他凝血因子），PS可促進(jìn)APC對(duì)因子V a的抑制作用，纖維蛋白形成所需的時(shí)間與受檢血漿中FPS的量成正相關(guān)。受檢者凝固時(shí)間可從標(biāo)準(zhǔn)曲線中計(jì)算出FPS的含量。
2）參考值：100.9%士29.1%。公共衛(wèi)生執(zhí)業(yè)
3）臨床意義：參見(jiàn)血漿總蛋白S測(cè)定。
4.血漿活化蛋白C抵抗（APCR）試驗(yàn)
（1）原理：在受檢血漿中加入FⅫ激活劑和部分凝血活酶，啟動(dòng)內(nèi)源性凝血途徑，再加入活化的蛋白C（APC），由于APC可裂解FⅧa、FⅤ a，使其滅活，導(dǎo)致APTT延長(zhǎng)。如果受檢血漿APTT延長(zhǎng)不明顯，提示患者存在活化蛋白C抵抗現(xiàn)象。通過(guò)比較加和未加APC的APTT比值的高低判斷 APCR存在與否。
（2）參考范圍：APCR比值=APC-APTT（S）／APTT（S），》2.0。
（3）臨床意義：FⅤ Leiden突變時(shí)，APCR陽(yáng)性。